Buồng đếm hồng cầu – Cấu tạo, cách sử dụng

Chu Văn An

Buồng đếm hồng cầu dùng để đếm trực tiếp số lượng tế bào nhằm xác định số lượng nhóm sinh vật. Đây là phương pháp xác định trực tiếp số lượng tế bào của các nhóm vi sinh vật. Trong bài viết dưới đây LabTrường Lê Hồng Phong sẽ chia sẻ những thông tin cụ thể về thiết bị phân tích vi sinh này với các bạn.

1. Buồng đếm hồng cầu là gì?

Buồng đếm hồng cầu là phương pháp trực tiếp để xác định tổng số nhóm vi sinh vật trong đất, nước và không khí; dịch nuôi cấy hoặc môi trường tương tự. Phương pháp này đếm số lượng tế bào trực tiếp trên kính hiển vi.

Hình 1: Buồng đếm hồng cầu là phương pháp xác định tổng số nhóm vi sinh vật

Cho phép người dùng đếm số lượng vi sinh vật lớn như tảo đơn bào, nấm men, bào tử nấm mốc. Tuy nhiên, buồng đếm hồng cầu không dùng để đếm vi khuẩn. Phương pháp này chỉ dùng để đếm tổng số tế bào, không phân biệt được tế bào sống và tế bào chết.

2. Cấu tạo buồng đếm hồng cầu

Buồng đếm hồng cầu có hình chữ nhật và là một tấm kính dày, trong suốt. Buồng đếm được thiết kế chia làm 3 phần: phần lõm ở giữa và phần phẳng chia làm 2 khoảng nhỏ. Mỗi không gian này có một lưới đếm gồm 400 ô nhỏ. Thể tích mỗi ô nhỏ là 1/4000 mm³, tương đương 1/4000.000ml. Buồng đếm hồng cầu có hai loại: Buồng đếm thường và buồng đếm tráng bạc.

Ưu điểm của buồng đếm tráng bạc là giúp tế bào vi sinh vật hiện rõ hơn khi quan sát qua kính hiển vi. Các yếu tố như chất lượng buồng đếm (bao gồm cả lão hóa, trầy xước); hoặc chất lượng của kính hiển vi (bao gồm độ sáng của nguồn sáng và chất lượng của thấu kính) có thể ảnh hưởng đến kết quả quan sát được trong buồng đếm.

Hình 2: Cấu trúc buồng đếm hồng cầu

3. Cách đếm tế bào bằng buồng đếm hồng cầu

Cách xác định tế bào trực tiếp bằng buồng đếm hồng cầu bao gồm các bước sau:

• Bước 1: Pha loãng mẫu cần đếm thành dung dịch loãng sao cho mỗi ô nhỏ của buồng đếm chứa khoảng 5-10 ô, ô lớn chứa 10-50 ô.
• Bước 2: Lắc đều ống nghiệm chứa dung dịch mẫu đã pha loãng. Tiếp theo, nhỏ một giọt dung dịch vào giữa buồng đếm và tráng nhẹ dung dịch sao cho dung dịch chảy đều vào buồng đếm.
• Bước 3: Đặt lam kính lên trên buồng đếm, ấn nhẹ để bịt kín không để bọt khí lọt vào.
• Bước 4: Đặt buồng đếm lên bàn soi dưới kính hiển vi.
• Bước 5: Dùng kính hiển vi đếm số lượng tế bào trong dung dịch sau khoảng 3-5 phút sau khi thả dung dịch vào buồng đếm.

Hình 3: Cách nhận biết tế bào trực tiếp bằng buồng đếm hồng cầu

4. Phân loại buồng đếm hồng cầu

Buồng đếm hồng cầu được phân loại theo loại buồng đếm và dạng lưới của buồng đếm. Cụ thể:

4.1. Phân loại buồng đếm hồng cầu theo hình sọc

Buồng đếm hồng cầu có hai loại vạch chia buồng đếm bao gồm:

• Vạch sáng: Trên bề mặt buồng đếm, lưới đếm được khắc thành một lớp màng kim loại mỏng tạo bởi hơi, có đường ranh giới. Ranh giới tế bào đếm có độ tương phản tốt với nền kim loại sẫm màu, trông sáng và rõ ràng dưới kính hiển vi.
• Đường kẻ tối: Lưới vuông có ranh giới khắc trên bề mặt kính. Khi nhìn qua kính hiển vi, những ranh giới này có vẻ tối.

4.2. Phân loại loại lưới của buồng đếm hồng cầu

Nếu phân loại dạng lưới của buồng đếm hồng cầu sẽ có các loại phổ biến sau:

4.2.1. Buồng đếm hồng cầu Neubauer cải tiến

Buồng đếm tế bào Neubauer được sử dụng phổ biến nhất có độ sâu tiêu chuẩn là 0,1mm. Buồng đếm có 9 ô vuông lớn, mỗi ô 1mm2. Ở giữa hình vuông lớn được chia thành 25 nhóm hình vuông, mỗi cạnh dài 0,2mm. Các nhóm hình vuông được chia thành 16 hình vuông nhỏ, mỗi hình có diện tích 0,05*0,05 mm = 0,0025 mm2.

4.2.2. Buồng đếm hồng cầu Buerker

Buồng đếm hồng cầu Buerker có độ sâu khoảng 0,1mm. Lưới đếm rộng 9mm2, được chia thành 9 vùng lớn được phân giới bằng 3 đường kẻ. Mỗi khu vực lớn được chia thành 16 khu vực nhỏ (diện tích 0,2*0,2 mm2) bằng các đường đôi có kích thước 0,05mm. Các đường đôi giao nhau tạo thành một hình vuông nhỏ (diện tích 0,05*0,05 mm2).

4.2.3. Fuchs – Buồng đếm hồng cầu Rosenthal

Buồng đếm tế bào Fuchs – Rosenthal có độ sâu 0,2 mm. Diện tích ô vuông có diện tích 16mm2, được chia thành 16 ô lớn, mỗi cạnh dài 1mm. Các ô vuông lớn cách nhau bằng 3 đường thẳng cách nhau 0,01 mm. Các đường trung tâm cách nhau 1mm. Buồng đếm có 16 ô vuông lớn chia thành 16 ô vuông nhỏ, cạnh dài 0,25mm.

4.2.4. Buồng đếm hồng cầu Thomas

Buồng đếm hồng cầu Thoma có độ sâu 0,1 mm. Diện tích vùng đếm tế bào là 1*1 mm2. Buồng đếm được chia thành các nhóm hình vuông, chiều dài cạnh 0,2 mm. Nhóm các ô vuông được chia thành 16 ô vuông nhỏ (diện tích 0,05*0,05 mm = 0,0025 mm2)

4.2.5. Buồng đếm tế bào Malassez

Buồng đếm hồng cầu Malassez có độ sâu 0,2 mm. Vùng đếm hình chữ nhật lớn (diện tích 0,25*0,2 = 0,05 mm2). Diện tích của hộp đếm là 2 * 2,5 mm2. Mỗi ô hình chữ nhật được chia thành 20 ô hình chữ nhật nhỏ (diện tích 0,05*0,05 mm = 0,0025 mm2)

LabTrường Chu Văn An vừa chia sẻ thông tin về buồng đếm hồng cầu với các bạn qua bài viết. Đơn vị chúng tôi hiện đang phân phối các dòng buồng đếm tế bào chính hãng của các thương hiệu hàng đầu. Hãy liên hệ ngay với LabTrường Chu Văn An để được tư vấn và hỗ trợ.